1. Oikean solulinjan valitseminen
Kun valitset sopivaa solulinjaa kokeilullesi, ota huomioon seuraavat kriteerit:
a. Laji: Ei-ihmis- ja ei-kädellisillä solulinjoilla on yleensä vähemmän bioturvallisuusrajoituksia, mutta lopulta kokeesi määrittää, käytetäänkö tietyn lajin viljelmää.
b.Ominaisuudet: Mikä on kokeilusi tarkoitus?Esimerkiksi maksasta ja munuaisista peräisin olevat solulinjat voivat olla sopivampia toksisuustestaukseen.
c. Rajoitettu tai jatkuva: Vaikka valinta rajoitetusta solulinjasta voi tarjota sinulle enemmän vaihtoehtoja oikean toiminnan ilmentämiseen, jatkuvia solulinjoja on yleensä helpompi kloonata ja ylläpitää.
d. Normaali tai transformoitunut: Transformoiduilla solulinjoilla on yleensä suurempi kasvunopeus ja korkeampi kylvöteho, ne ovat jatkuvia ja vaativat vähemmän seerumia viljelyväliaineessa, mutta niiden fenotyyppi on muuttunut pysyviksi geneettisen transformaation seurauksena.
e. Kasvuolosuhteet ja ominaisuudet: Mitkä ovat vaatimukset kasvunopeudelle, kyllästystiheydelle, kloonaustehokkuudelle ja suspension kasvukyvylle?Esimerkiksi rekombinanttiproteiinien ilmentämiseksi korkeilla saannoilla saatat joutua valitsemaan solulinjoja, joilla on nopea kasvunopeus ja kyky kasvaa suspensiossa.
f. Muut kriteerit: Jos käytät rajoitettua solulinjaa, onko varastossa riittävästi varastossa?Onko solulinja täysin karakterisoitu vai täytyykö sinun varmistaa se itse?Jos käytät epänormaalia solulinjaa, onko olemassa vastaavaa normaalia solulinjaa, jota voidaan käyttää kontrollina?Onko solulinja vakaa?Jos ei, kuinka helppoa se on kloonata ja tuottaa tarpeeksi pakastettua varastoa kokeiluasi varten?
2. Hanki solulinjat
Voit rakentaa oman viljelmäsi primaarisoluista tai voit ostaa vakiintuneita soluviljelmiä kaupallisilta tai voittoa tavoittelemattomilta toimittajilta (eli solupankeilta).Hyvämaineiset toimittajat tarjoavat korkealaatuisia solulinjoja, joiden eheys on testattu huolellisesti ja jotka varmistavat, että viljelmässä ei ole epäpuhtauksia.Suosittelemme, että viljelmiä ei lainata muista laboratorioista, koska niissä on suuri soluviljelmien kontaminaatioriski.Riippumatta sen lähteestä, varmista, että kaikki uudet solulinjat on testattu mykoplasmakontaminaation varalta, ennen kuin aloitat sen käytön.
Postitusaika: 01.02.2023